Модифицированные лимфоциты продемонстрировали эффективность в борьбе с ВИЧ
Группа ученых из США на этой неделе представила предварительные результаты испытаний специально разработанных мультиспецифичных duoCAR-T-лимфоцитов, предназначенных для подавления ВИЧ. Предложенный специалистами вариант модификации лимфоцитов, описанный в статье в Science Translational Medicine, продемонстрировал эффективность в борьбе с различными штаммами вируса в клеточной культуре и селезенке грызунов. Некоторые варианты CAR-T также показали профилактическое действие.
Как пишут авторы статьи, генетическая модификация Т-лимфоцитов, в рамках которой в Т-клетки пациента вводят ген химерного антигенного рецептора (CAR), уже зарекомендовала себя в области иммунотерапии рака крови. CAR состоят из подвижного участка антитела, распознающего необходимый антиген, и внутриклеточного домена, активирующего Т-клетку (CAR-T).
Принцип действия CAR-T-лимфоцитов заключается в том, что они устанавливают антиген на поверхности клетки-мишени, активируются и уничтожают ее.
Тем не менее, несмотря на высокие результаты новой терапии в области лечения рака, до последнего времени подвижек в реализации методики CAR-T при лечении ВИЧ-инфекции не было.
В 2017 году ученые обнаружили, что гибридный белок с доменами m36.4 и mD1.22, связывающимися с участками на гликопротеинах gp120 (содержатся в оболочке ВИЧ-1), способен остановить проникновение ВИЧ в клетки. Позднее было показано, что установленный эффект усиливался добавлением белка C46 (аналога T20, или энфувиртида), который взаимодействовал с еще одним гликопротеином оболочки вируса gp41 и препятствовал слиянию мембран клетки и ВИЧ.
Данные открытия были использованы группой микробиологов во главе с д-ром Боро Дропуличем, которая сумела создать ряд модифицированных вариантов CAR-T-клеток, чьи рецепторы содержали m36.4, mD1.22 и C46 – monoCAR-T и duoCAR-T-клетки (несущие один и два рецептора соответственно). По количеству доменов ГМ-лейкоциты были моно, ди- и триспецифичными.
В ходе испытаний in vitro и in vivo специалисты подтвердили способность полученных CAR-T-клеток связывать комплекс gp120/gp41. После этого учеными было изучено противовирусное действие различных CAR-T в клеточной культуре HEK 293T, и результаты исследования доказали эффективность работы модифицированных агентов.
Далее специалисты испытали monoCAR-T и duoCAR-T на культурах человеческих мононуклеарных клеток периферической крови (МКПК), в которые предварительно были введены 11 разных штаммов ВИЧ-1. Данные анализа продемонстрировали антивирусное действие лейкоцитов даже в отношении резистентных штаммов ВИЧ. Кроме того, было подтверждено, что те из лейкоцитов, что несли в себе домен m36.4, не были подвержены инфицированию.
Наконец, в целях проверки методики in vivo биологами была использована группа иммунодефицитных NSG мышей, в селезенку которых вводили смесь человеческих МКПК, зараженных ВИЧ-1, и duoCAR-T-клетки.
По сведениям авторов статьи, спустя неделю в селезенке грызунов вирусная ДНК уже практически отсутствовала: duoCAR-T уничтожили почти все инфицированные клетки. Ингибирование инфекции продолжалось в течение месяца, показав еще одно преимущество CAR-T-методики перед традиционной АРВТ.
Ученые считают, что испытанная ими терапия, вероятно, будет способна ликвидировать и неактивные штаммы вируса, формирующие так называемые «резервуары». Сегодня в клинической практике еще не используются методики, способные обнаружить и уничтожить латентные формы ВИЧ.
Разработчики рассчитывают, что многообещающие результаты и неоспоримые преимущества мультиспецифичных duoCAR-T способствуют скорому началу клинических исследований.